ELISA試劑盒變質(zhì)是ELISA實(shí)驗(yàn)中比較常見的問題,那么,ELISA試劑盒變質(zhì)是因?yàn)槭裁茨?是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保?一旦變質(zhì)會有什么影響呢?晶抗生物為大家詳細(xì)分析下。
操作因素
ELISA試劑盒操作步驟復(fù)雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色.
方法學(xué)的影響
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、|GM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb、HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不Gong平竟?fàn)幍纫蛩氐挠绊?,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制.
試劑因素
不同批次的ELISA試劑盒在制作過程中很難保證質(zhì)量一致,即使是通過批批檢的項(xiàng)目其檢測結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑并保證保存條件.嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效.
樣本因素
標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體等,后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被污染、標(biāo)本貯存時間過長、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等.
灰區(qū)的設(shè)置
通常情況下,ELISA試劑盒定性實(shí)驗(yàn)以“陽性"和“陰性"來報(bào)告結(jié)果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值"(截止值,CO值),這是定性免疫測定結(jié)果報(bào)告的依據(jù).
常表示結(jié)果的常用方法
1.定性測定
2.半定量測定結(jié)果一般以滴度表示.
3.定量測定即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行EL ISA測定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果以絕對量或單位表示.在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,
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