国产欧美va欧美va在观看_欧美变态口味重另类一区二区_性做久久久久久久免费看_亚洲激情不卡视频_国产精一级特级毛片

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 晶抗生物為您淺談原代細(xì)胞提取的正確方法
晶抗生物為您淺談原代細(xì)胞提取的正確方法
更新時(shí)間:2024-08-07   點(diǎn)擊次數(shù):766次

原代細(xì)胞是指直接從機(jī)體取出的組織或細(xì)胞獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞.這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等.由于原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,繁殖一定的代數(shù)停止生長(zhǎng).所以一般認(rèn)為:培養(yǎng)的原代的1代和傳代到10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱(chēng)為原代細(xì)胞培養(yǎng)。晶抗生物為大家總結(jié)了原代細(xì)胞的提取的整個(gè)操作過(guò)程,一起來(lái)看看吧!


原代細(xì)胞的提取的整個(gè)操作過(guò)程:

1.整個(gè)操作要在潔凈通風(fēng)的超凈臺(tái)下進(jìn)行,所有的器材要高壓消毒。2.根據(jù)BALB/c小鼠的體重,用10mlkg3%濃度的麻醉;將小鼠置于盛有75%乙醇的燒杯內(nèi),這一步不僅可以消毒,也可以讓小鼠體毛浸濕,后續(xù)制去皮毛的時(shí)候不會(huì)沾到剪刀或組織上。

3.用鑷子輕輕挑起小鼠的心臟,裝有公共廣播公司的注射器插入心尖,同時(shí)在右心耳處剪開(kāi)一個(gè)小口,緩慢推動(dòng)注射器,隨著心臟的跳動(dòng),將體內(nèi)的血液沖洗出來(lái)。

4.取出小鼠的肺部組織,將肺組織切成小米粒樣的大小,置于預(yù)冷的Hbss中反復(fù)沖洗幾次。

5.將小米粒大小的肺組織置于培養(yǎng)瓶中(培養(yǎng)瓶一天用1%明膠溶液包被培養(yǎng)面,4度過(guò)夜,小鼠處理,將培養(yǎng)瓶放置培養(yǎng)箱中,使其溫度恢復(fù)至37度),置于培養(yǎng)箱37度的環(huán)境下,消化4個(gè)小時(shí)。

6.消化4小時(shí)后,加入RPMI1640培養(yǎng)基(有10%血清、1%雙抗、1%內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子)10M|(添加培養(yǎng)基,可以是正常培養(yǎng)時(shí)的2倍量),繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)(繼續(xù)培養(yǎng)的時(shí)間可根據(jù)細(xì)胞貼壁情況適當(dāng)調(diào)整)。

7.24小時(shí)后,取出肺組織,鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),換液。

8.原代細(xì)胞的提取和培養(yǎng)是很慢的過(guò)程,一般需等到24小時(shí)后,才能在鏡下看到些許細(xì)胞群,一周到兩周后才會(huì)看到鵝卵石樣的排列情況。

9.原代細(xì)胞2-3天換液一次,因?yàn)閮?nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)形成單層時(shí),會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象.所以,內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)接近單層時(shí)就可以傳代了,不要等到長(zhǎng)得非常滿。


上海晶抗生物結(jié)合多年細(xì)胞生物學(xué)經(jīng)驗(yàn),為廣大客戶提供直接、周到、完善的售后服務(wù),客戶可按需訂購(gòu),如果您對(duì)我們的產(chǎn)品有任何疑問(wèn),或?qū)ξ覀兊姆?wù)有任何意見(jiàn)或建議,歡迎您直接與原代細(xì)胞量大從優(yōu)客服聯(lián)系,我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)。

上海晶抗生物工程有限公司

上海晶抗生物工程有限公司

地址:上海市金山工業(yè)區(qū)亭衛(wèi)公路6558號(hào)9幢2441室

版權(quán)所有:上海晶抗生物工程有限公司  備案號(hào):滬ICP備16026504號(hào)-5  總訪問(wèn)量:550664  站點(diǎn)地圖  技術(shù)支持:智慧城市網(wǎng)  管理登陸