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晶抗生物告訴您ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作需要注意的事項(xiàng)
更新時(shí)間:2023-07-24   點(diǎn)擊次數(shù):871次

一、實(shí)驗(yàn)前將所有試劑平衡至室溫,包括樣本、TMB(非常重要)。

二、強(qiáng)烈建議老師在操作ELISA試劑盒的時(shí)候每個(gè)樣本包括標(biāo)準(zhǔn)品做復(fù)孔(請(qǐng)務(wù)必這樣操作),因?yàn)檫@樣可以,求平均值,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性對(duì)試劑盒的性能進(jìn)行評(píng)估對(duì)自己的操作進(jìn)行評(píng)估解決跳孔。


三、為保證老師ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確 ,其中幾點(diǎn)重要的操作注意事項(xiàng)請(qǐng)務(wù)必參考:

如果以下表述與說(shuō)明書中不一致,請(qǐng)按照實(shí)驗(yàn)對(duì)應(yīng)說(shuō)明書的要求操作 。

1、標(biāo)準(zhǔn)品溶解:標(biāo)準(zhǔn)品溶解嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作,建議老師進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí),在EP管中進(jìn)行。

2、孵育:說(shuō)明書中進(jìn)行孵育的時(shí)候,一定要用微孔板振蕩器振蕩,這個(gè)很重要,利于抗原抗體充分結(jié)合。

3、洗板:建議按照說(shuō)明書操作,每次洗滌至少洗液浸泡30s,重復(fù)6次,洗板時(shí)間太短、次數(shù)太少會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)效果 不佳,延長(zhǎng)洗板時(shí)間和增加洗板次數(shù)可以使背景更干凈。


、如何控制標(biāo)曲顯色(僅針對(duì)雙抗夾心法ELISA試劑盒)5 - 30分鐘顯色時(shí)間為經(jīng)驗(yàn)范圍,每個(gè)具體的實(shí)驗(yàn),可根據(jù)以下情況,確定大致的顯色時(shí)間:

1) 肉眼觀察:標(biāo)曲S5孔有淡藍(lán)色、Blank孔無(wú)明顯藍(lán)色時(shí),即可終止。

2) 儀器判斷:630 nm左右波長(zhǎng)下,標(biāo)曲S1孔的OD值達(dá)到0.5 - 0.7、S5孔的OD值達(dá)到0.05 - 0.08、Blank孔的OD 值小于0.05時(shí),即可終止。

3) 高敏系列試劑盒因靈敏度更高,需嚴(yán)格控制顯色時(shí)長(zhǎng),可較普通試劑盒適當(dāng)縮短顯色時(shí)間。

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