冷凍后的試劑盒處理方式
我們知道,完整的elisa試劑盒包含:
①酶的底物;
②已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
③酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
④結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
⑤洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
⑥陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);
⑦酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式 ELISA中一般采用2mol/L。
那么被冷凍后的試劑盒質(zhì)量會受損嗎?晶抗為您解答!
為其保存后可以使用,但不能反復(fù)凍融,如果您在一周之內(nèi)做實(shí)驗(yàn),可以2-8℃保存;如果您在一周至一個月之內(nèi)做實(shí)驗(yàn),可以-20℃保存如果您在一個月以上做實(shí)驗(yàn),可以-80℃保存。但是值得注意的是凍融一次比2-8℃保存損失的更大損失主要是蛋白的降解,凍融一次蛋白都有降解。
在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時,實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1~2小時,產(chǎn)物的天生可達(dá)。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫順4℃等。室溫溫育時要平置于操縱臺上即可。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度迅速平衡。操縱時的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在劃定的范圍內(nèi),尺度室溫溫度是指20~25℃,但詳細(xì)操縱時可根據(jù)仿單的要求控制溫育。
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