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如何使用兔血清以及保存注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2019-07-05   點(diǎn)擊次數(shù):2040次

兔血清的使用方法:

1、稱取本品23.5g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用。

2、樣品的稀釋及處理,略。

3、根據(jù)商檢的標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)?biāo)本污染情況的估計(jì),兔血清選擇2—3個(gè)稀釋度,分別在10倍遞增稀釋的同時(shí),即以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液于滅菌平皿內(nèi),每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。

4、稀釋液移入平皿后,應(yīng)及時(shí)將涼至45℃的瓊脂培養(yǎng)基(可放置于45℃水浴箱保溫)注入平皿約15mL,并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻。同時(shí)將瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。

5、待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平板,置36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h。

6、觀察結(jié)果并進(jìn)行計(jì)數(shù)。25-250個(gè)菌落為合適范圍。

兔血清保存注意事項(xiàng):

1、需要長期保存的兔血清必須儲(chǔ)存于-20℃ - 兔血清-70℃ 低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1月,由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱,必須預(yù)留定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?/p>

2、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 兔血清低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與兔血清成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。 

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