ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品的濃度
更新時(shí)間：2016-06-20 點(diǎn)擊次數(shù)：1750次
ELISA試劑盒陰性對(duì)照及陽(yáng)性對(duì)照：陰、陽(yáng)性對(duì)照若有正確的結(jié)果，對(duì)試劑盒操作的結(jié)果可以有粗略的判斷。
其實(shí)這個(gè)主要是看顯色的時(shí)候用的是什么底物了，OPD的話要避光，因?yàn)檫@種底物受光照后會(huì)自行變色，如果用TMB底物的話，就沒(méi)這么嚴(yán)格了，ELISA試劑盒其他的步驟中像抗原綁定、洗滌之類(lèi)也都不用避光的，只有在做完二抗洗滌完上酶顯色底物的時(shí)候。因?yàn)榇蟛糠值牡孜飳?duì)光敏感的，見(jiàn)光會(huì)分解，所以要求避光操作。
當(dāng)顯色完成后（顯色時(shí)間是比較短的，需要預(yù)先摸索好）加入顯色終止液后溶液顏色會(huì)在幾個(gè)禮拜之內(nèi)保持穩(wěn)定，也不用再避光了。以減去本底后的OD值為X軸，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸，ELISA試劑盒利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計(jì)算方法。建議使用合適的軟件來(lái)作圖，比如CurveExpert1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對(duì)數(shù)、對(duì)數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條zui合適的方程。要想檢驗(yàn)?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合，可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù)，將對(duì)應(yīng)的OD值帶入該方程，計(jì)算出，得到的結(jié)果應(yīng)該與實(shí)際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度zui高的那條曲線。
