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鴨ELISA試劑盒敘述各個步驟
更新時間:2016-06-01   點擊次數(shù):1434次

鴨ELISA試劑盒質(zhì)量保證是一個復(fù)雜的過程,許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測的質(zhì)量?,F(xiàn)分述如下:
一、方法學(xué)的影響
ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法因受操作時差所引起的平競爭等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。
二、試劑因素
1.試劑的選擇
    免疫檢測的原理均基于抗原抗體反應(yīng)。由于該反應(yīng)過程受多種因素的影響,如普遍存在基質(zhì)效應(yīng)、交叉反應(yīng)等,因而檢測結(jié)果難以溯源,不同方法、不同試劑之間甚至同一試劑不同批號間結(jié)果均缺乏可比性。試劑質(zhì)量在很大程度上決定了檢測的水平,因此在引入新項目之前必須對試劑進(jìn)行嚴(yán)格的評估。鴨ELISA試劑盒的評估有以下幾個步驟:⑴確定開展該項目的必要性;⑵了解該項目現(xiàn)有的檢測方法和原理;⑶在了解試劑的組成基礎(chǔ)上選擇多家試劑盒進(jìn)行比較,判斷標(biāo)準(zhǔn)參考方法或參考物質(zhì),其次為臨床的滿意度及機(jī)構(gòu)的報告如各級室間質(zhì)量評價、CDC報告等;⑷定期對檢測結(jié)果進(jìn)行追蹤反饋直至zui終認(rèn)可該試劑。標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風(fēng)濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時間過長、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。其中外源性干擾因素是我們在檢測過程中可以避免也是必須避免的因素,而避免內(nèi)源性因素的干擾則主要通過選擇合適的試劑盒。在臨床中遇到少見的疑難病例時應(yīng)當(dāng)考慮到內(nèi)源性干擾因素的存在。

以下對外源性干擾因素進(jìn)行簡要說明:
1.標(biāo)本溶血 要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其具有類過氧化物的活性,因此,在以辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)為標(biāo)記酶的鴨ELISA試劑盒測定中,如果血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的底物反應(yīng)顯色。

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